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胎牛血清使用指南

文章出處:解決方案責任編輯:愛必勝生物科技(東莞)有限公司 發表時間:2023-03-25

胎牛血清是從胎牛臍靜脈或心臟采集的血液經離心、過濾、滅菌等處理后得到的一種液態制品。胎牛血清通常分為胎兒血清和新生牛犢血清兩種,其中胎兒血清是指從胎牛臍靜脈采集的血液,而新生牛犢血清則是指從出生后7天內采集的血液。本文將對胎牛血清的用途、主要成分、功能、制作方法、儲存方式、溶解方式、使用注意事項等進行詳細全面的闡述。

一、用途

胎牛血清是一種重要的細胞培養基添加劑,可以提供細胞生長所需的營養物質、生長因子和激素等,促進細胞增殖和分化。此外,胎牛血清還廣泛應用于疫苗制備、生物制品生產、藥物篩選等領域。

二、主要成分

胎牛血清主要由水、蛋白質、脂質、糖類、無機鹽和生長因子等組成。其中,蛋白質是胎牛血清的主要成分,占總質量的60%~80%。此外,胎牛血清中還含有多種生長因子,如胰島素樣生長因子、表皮生長因子、成纖維細胞生長因子等,這些生長因子對細胞生長和分化具有重要的作用。

三、功能

胎牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用于動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。

1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。

2.增加細胞對病毒和細菌的抵抗力,促進細胞代謝和免疫功能的提高。

3.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。

4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。

5.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

6.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。

7.起酸堿度緩沖液作用。

四、制作方法

胎牛血清的制作方法通常包括采集、處理、檢測和包裝等步驟。具體步驟如下:

1. 采集:胎牛心臟穿刺取血

2. 處理:預過濾血清、精過濾血清,三次0.1um過濾,避免病原微生物的污染

3. 檢測:進行多項的質量控制檢測,以及全面的理化、微生物檢測,同時進行特定的細胞生長以及病毒檢測。

4. 包裝:將檢測后的胎牛血清進行分裝和包裝,以便于存儲和使用。

五、儲存方式

建議胎牛血清到貨后,先檢查血清有無異常后及時放進冰箱,在-18~-20℃條件下進行儲存。血清不宜4℃甚至更高溫度長期保存,切忌反復凍融,少量使用時建議分裝凍存。(整個操作需在無菌操作臺中進行,注意無菌操作。)血清結冰時體積會增加約10%,因此在分裝血清時須預留一定體積,否則易導致分裝瓶凍裂而發生污染。

六、溶解方式

建議使用血清梯度融化方法,以500ml裝血清為例:

第一步:將血清從-20℃冰箱中取出后放置在室溫90min或者15℃水浴18min

第二步:將血清放置在20℃水浴中融化25min

第三步:將血清放置在37℃水浴中融化35min

此類融化方法可以保證血清中各類因子的活性并且極大減少沉淀的產生。

七、使用注意事項

1. 胎牛血清應存放在低溫環境中,避免受到陽光直射和高溫的影響。

2. 在使用前,應先將胎牛血清緩慢解凍,并在4℃下保存,避免多次凍融。

3. 在使用胎牛血清時,應注意其批次和來源,以保證其質量和穩定性。

4. 在使用胎牛血清時,應注意其濃度和添加量,以避免對細胞生長和分化產生不良影響。

5. 在使用胎牛血清時,應注意其可能存在的病毒和細菌等污染物,以避免對細胞培養和生產產生不良影響。

綜上所述,胎牛血清是一種重要的細胞培養基添加劑,具有促進細胞增殖和分化、提高免疫功能等多種功能。在使用胎牛血清時,應注意其儲存方式、溶解方式和使用注意事項,以保證其質量和穩定性。

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